Mathilde Jacobine Augusta Nielsen (Neumann) var datter af lærer, handelsbogholder Jacob Theodor Neumann (1818 - 1876) og Marie Elisabeth Olsen (1815 - 1892). Hun debuterede på Casino 23. august 1884 som Ane i "Fastelavnsløjer". Fra Casino kom hun til Dagmarteatret 1889-1892 og 1894-1914 afbrudt af perioden 1892-1894 hvor hun var ved Folketeatret. Efter 1914 var hun ansat ved Det ny Teater. Hendes rollefag blev ret hurtigt de djærve, myndige - og til tider komiske - kvindetyper. Hun spillede bl.a. moderen i "Brand" og ammen i "Romeo og Julie". Hun debuterede i stumfilmen "Caprisiosa" fra 1910 og medvirkede i omkring 20 stumfilm. Både Dreyer og Benjamin Christensen brugte hende flere gange i deres film. Hendes største succes var rollen som hushjælpen Mads i Carl Th. Dreyers film "Du skal ære din hustru" fra 1925. I samme rolle fejrede hun triumfer først på Casino Teatret i Amaliegade, hvor rollen var rammen om hendes 50-års skuespillerjubilæum - og 18 år senere i Alice O'Fredericks' og Jon Iversens tonefilmsudgave "Tyrannens Fald" med Eyvind Johan-Svendsen - i en alder af 83 år. Hun blev derfor kaldt "verdens ældste filmskuespillerinde". Hun medvirkede i Benjamin Christensen "Hævnens Nat" og i A.W. Sandbergs "Klovnen". Desuden medvirkede hun i tonefilm "Kirke og Orgel", "Skal vi vædde en million", "De blaa drenge", "7-9.13", "Sommerglæder", "Tror du jeg er født i går" og "Tante Cramers Testamente". Mathilde Nielsen blev benyttet i radioens dramatiske udsendelser. Ved hendes 40 års jubilæum overværede Kongen forestillingen og overrakte hende i pausen medaljen Ingenio et Arti. Ved sit jubilæum modtog hun fortjenstmedaljen i guld. Mathilde Nielsen var søster til skuespillererne Sophus Elias Neumann (18-06-1846 i København - 04-03-1912) og Victor Neumann. Hun blev gift den 16. januar 1886 i København med forretningsfører, senere grosserer Olaf Frederik Kirstein Nielsen (12-10-1849- 04-02-1902). Hun er mor til operasangerinden Ellen Nielsen.